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新闻中心
登革热试剂盒反应的五个要素点击次数：342 更新时间：2022-09-15
登革热试剂盒是用来定性检测人血清、血浆和全血中的登革热病毒IgM和IgG抗体的方法。这方法能用来鉴别初次和二次感染。它仅能用来检测具有临床登革热症状的病人的样本。结果是假定阳性的，必须经病毒分离、双份血清分析、免疫组织化学检测抗原或病毒核酸检测证实有登革热病毒感染。
登革热病毒PCR检测试剂盒反应五要素:参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP.模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键，PCR产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度:15-30bp.常用为20bp左右。
②引物扩增跨度:以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免弓|物内部出现二级结构，避免两条引|物间互补，特别是3端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的打增条带。
⑤引物3端的碱基，特别是最末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点，被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点，这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umo或10~100pmol,以弓|物量“生所需要的结果为好，引物浓度偏高会弓|起错配和非特异性扩增，且可增加弓|物之间形成二聚体的机会。
广州健仑生物科技有限公司(www.jianlun45.com) 热门产品:喹诺酮类检测试剂盒,西尼罗河检测试剂,基孔肯雅热试剂,寨卡检测试剂,疫病核酸试剂
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