磺胺三合SAs的用途检测

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磺胺三合SAs的用途检测

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磺胺三合SAs的用途检测

检测时，加入标准品或样品溶液，样本中的磺胺类药物和酶标板上预包被偶联抗原竞争抗磺胺类药物抗体，加入酶标记物后，用TMB底物显色，样本吸光度值与其所含磺胺类药物含量成负相关，与标准曲线比较即可得出样本中磺胺类药物的残留量。

检测下限：

组织（高检测限方法/0.1ppb，组织（低检测限方法）/1ppb，血清、尿液、鸡蛋/0.4ppb，蜂蜜/0.1ppb，牛奶/2ppb，饲料/4ppb

3 试剂盒组成

酶标板……………………………96孔

标准液：各1ml

0ppb、0.1ppb、0.3ppb、0.9ppb、2.7ppb、8.1ppb

1）用均质器均质鸡蛋样本，使蛋清和蛋黄充分混合；

2）称取2.0±0.05g均质后的鸡蛋样本（蛋粉1g加3ml去离子水混匀后取2ml相当于2g鲜鸡蛋）至50ml离心管中，加入8ml乙腈，立即用振荡器振荡10min，室温4000r/min以上离心5min；

3）移取1ml上清液至10ml洁净干燥玻璃试管中于，在50-60℃氮气或空气吹干；

4）加入1ml正己烷，用涡旋仪涡动30s溶解干燥的残留物，再加入1ml复溶工作液，用涡旋仪涡动1min，室温4000r/min以上离心5min；

5）去上层有机相，取下层水相50ul用于分析。

样本稀释倍数: 4  检测下限：0.4ppb  

5.3.4 血清样本处理方法

1）将血样本于室温放置30min，室温4000r/min以上离心10min，分离出血清或过滤血清；

2）取1ml血清，加入3ml 0.1M PB缓冲液混合，混合30s；

3）取50µl用于分析。  

样本稀释倍数：4  检测下限：0.4ppb　　

5.3.5 蜂蜜样本处理方法

1）称取1±0.05g蜂蜜样本于50ml离心管中，加入1ml 0.5M盐酸置于37℃环境中30min；

2）加入2.5ml 0.2M 氢氧化钠 (将PH值调至5左右)再加入4ml乙酸乙脂振荡5min，4000r/min以上室温离心5min；

3）取2ml上层液体于50℃下氮气吹干，加0.5ml 已稀释好的复溶液复溶，混合30s；

4）取50µl用于分析。  

样本稀释倍数：1   检测下限：0.1ppb

5.3.6 尿样本处理方法

1）用3ml 0.1M PB缓冲液与1ml经离心后的清亮尿样本混合，混合30s；

2）取50µl液体用于分析。  

样本稀释倍数: 4   检测下限：0.4ppb 

5.3.7 牛奶样本处理方法

1）取100ul牛奶样本用0.1M PB缓冲液按1︰19（v/v）稀释（即100ul牛奶+1.9ml 0.1M PB缓冲液），混合30s；

2）取50µl用于分析。  

样本稀释倍数：20   检测下限：2ppb     

5.3.8 饲料样本处理方法

1）称取2.0±0.05g饲料样本至50ml聚苯乙烯离心管中，加入8ml乙腈，振荡5min，室温4000r/min以上离心5min；

2）移取1ml上层有机相至10ml洁净干燥玻璃试管中，在50-60℃氮气或空气吹干；

3）加入1ml正己烷，用涡旋仪涡动30s，再加入1ml 0.1M磷酸盐缓冲溶液，用涡旋仪涡动30s混匀，转入2ml聚苯乙烯离心管中，室温4000r/min以上离心5min；

4）除去上层有机相，移取100ul下层水相至2ml离心管中，加入 900ul 0.1M磷酸盐缓冲溶液，用涡旋仪涡动1min，混匀；

5）取50ul用于分析。