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黄热病检测试剂盒(酶联免疫法)
广州健仑生物科技有限公司
广州健仑生物科技有限公司是集研制开发、销售、服务于一体的高新技术企业,公司产品涉及临床快速诊断试剂、食品安全检测试剂,动物疾病防疫检测试剂,免疫诊断试剂、临床血液学和体液学检验试剂、微生物检验试剂、分子生物学检验试剂等等。
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黄热病检测试剂盒(酶联免疫法)
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3、将下层培养基(液体LB培养基+1.5%琼脂粉)倒平板(作为底层营养琼脂),凝固后将平板放置于37℃保温备用。
4、吸取100μl噬菌体原液与100μl宿主菌过夜培养菌液混匀,37℃孵育20min。
5、将100ml上层培养基(即半固体培养基:液体LB培养基+0.7%琼脂粉)融化后,于45℃水浴保温备用。
6、将步骤4孵育后的混合液加入已融化好45℃保温的上层培养基中,充分混匀,迅速倒入步骤3准备好的下层培养基上,旋转平皿使其分布均匀,待其凝固后,37℃倒置培养后,观察有无噬菌斑。
7、如果滤液中没有特异性噬菌体,则不形成噬菌斑;如有噬菌体存在,则可在平板上形成噬菌斑。
8、用枪头挑取直径较大的噬菌斑,置于500μl SM保存液中,4°C放置3h。
9、用0.2μm微孔滤膜过滤,用SM保存液将滤液作10倍梯度稀释。
10、用稀释液按照双层平板法实验,涂板作单斑培养。
11、用5ml LB管将宿主菌培养至对数生长早期。
12、从平板挑直径较大的单个噬菌斑接种于1ml培养好的宿主菌液,37°C培养6h增殖。
13、再用双层平板法观察噬斑的形态,重复操作3~5次。目的是得到形状和大小*的噬菌斑。