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黄热病毒核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

黄热病毒核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

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广州健仑生物科技有限公司是集研制开发、销售、服务于一体的高新技术企业,公司产品涉及临床快速诊断试剂、食品安全检测试剂,动物疾病防疫检测试剂,免疫诊断试剂、临床血液学和体液学检验试剂、微生物检验试剂、分子生物学检验试剂等等。黄热病毒核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

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黄热病毒核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

广州健仑生物科技有限公司

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黄热病毒核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

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二、琼脂免疫扩散试验方法

材料与试剂

1、琼脂粉

2、平皿

3、打孔器

4、生理盐水或其他缓冲液,可加1/万的硫柳汞或叠氮钠防腐。

操作方法

1、称取一定量的琼脂粉,按1%左右(0.8%~1.5%)的比例加入生理盐水或缓冲液,水浴煮沸融化20min。

2、将融化的琼脂倒入平皿内,使厚度2mm~3mm。自然冷却。

3、根据要求(孔径即孔的直径,孔距即两孔圆心之间的距离,包括两孔的半径)按模板打孔。也可直接用组合打孔器打孔。现在一般多打成梅花形孔图。

4、挑出孔内琼脂,注意不要挑破孔缘。

5、在火焰上缓缓加热,使孔底边缘的琼脂少许熔化,以封底,以免加样后液体从孔底渗漏。

6、以毛细滴管吸取样品加入孔内,注意不要产生气泡,以加满为度。加少了,影响反应程度,加多了,易溢出,也影响反应结果。

7、加毕后,盖上平皿盖,将平皿翻过来,置湿盘中,37℃自由扩散24h~48h。

三、结果判定

1、用以检测抗原或比较抗原差异时,将抗血清置中心孔,将待测抗原或需比较的抗原置于周围相邻孔。若出现沉淀带完全融合,证明为同种抗原;若二者有部分相连,表明二者有共同抗原决定簇;若二条沉淀线相互交叉,说明二者抗原完全不同。

2、用做血清流行病学调查时,将标准抗原置中心孔,周围1、3、5孔加标准阳性血清,2、4、6孔分别加待检血清。待检孔与阳性孔出现的沉淀带完全融合者判为阳性。待检血清无沉淀带或所出现的沉淀带与阳性对照的沉淀带完全交叉者判为阴性。待检孔虽未出现沉淀带,但两阳性孔的沉淀带在接近待检孔时,两端均内向有所弯曲者判弱阳性。若仅一端有所弯曲,另一端仍为直线者,判为可疑,需重检。重检时,可加大检样的量。

检样孔无沉淀带,但两侧阳性孔的沉淀带在接近检样孔时变得模糊、消失,可能为待检血清中抗体浓度过大,致使沉淀带溶解,可将样品稀释后重检。

3、用以检测抗血清的效价时,将抗原置中心孔,抗血清倍比稀释后置周围孔,以出现沉淀带的血清最高稀释倍数为该抗血清的琼扩效价。

 

四、注意事项

1、不规则的沉淀线可能是加样过满溢出、孔型不规则、边缘开裂、孔底渗漏、孵育时没放水平、扩散时琼脂变干燥、温度过高蛋白质变性或未加防腐剂导致细菌污染等所致。

2、抗原抗体的比例与沉淀带的位置、清晰度有关。如抗原过多,沉淀带向抗体孔偏移和增厚,反之亦然。可用不同稀释度的反应液试验后调节。

想得到好的测序结果,首先得有个高质量的DNA样品,所以取样与DNA提取是大家普遍关心的问题。本文整理了各种微生物样本的取样和基因组DNA提取方法,超实用干货!

一、粪便

(一)人粪便取样方法

1、用无菌的粪便收集器或其他器皿收集病人和健康人新鲜的粪便样本;

2、在实验室将装好病人和健康人体检后的粪便样本立即放在冰上进行分装并标记;

3、用无菌牙签或粪便取样器截取样品中段里部,外部容易污染,且接触空气后,部分细菌DNA开始降解;

4、用灭菌离心管每管称取0.2g左右粪便样本,每个样本总共10管,分装好后立即放入-80℃保存;

5、 每次实验使用一管,未用完丢弃。

广州健仑生物科技有限公司(www.jianlun45.com) 热门产品:喹诺酮类检测试剂盒,西尼罗河检测试剂,基孔肯雅热试剂,寨卡检测试剂,疫病核酸试剂
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