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Novabios诺如病毒抗原检测试剂盒快速检测法

Novabios诺如病毒抗原检测试剂盒快速检测法

型    号: 出入境专用
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广州健仑生物科技有限公司是集研制开发、销售、服务于一体的高新技术企业,公司产品涉及临床快速诊断试剂、食品安全检测试剂,动物疾病防疫检测试剂,免疫诊断试剂、临床血液学和体液学检验试剂、微生物检验试剂、分子生物学检验试剂等等。Novabios诺如病毒抗原检测试剂盒快速检测法

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Novabios诺如病毒抗原检测试剂盒快速检测法

广州健仑生物科技有限公司

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(三)透析

1、蛋白质溶液10 000g离心30 min(4℃)。弃上清保留沉淀;

2、将沉淀溶于少量(10-20ml )PBS-0.2g /L叠氮钠中。沉淀溶解后放入透析袋,对PBS-0.2g/L叠氮钠透析24-48小时(4℃),每隔3-6小时换透析缓冲液一次,以彻底除去硫酸氨;

3、透析液离心,测定上清液中蛋白质含量。

四、注意事项

(一) 先用较低浓度的硫酸氨预沉淀,除去样品中的杂蛋白。

1、边搅拌边慢慢加SAS到样品溶液中,使浓度为0.5:1 (v/v);

2、将溶液放在磁力搅拌器上搅拌6小时或过夜(4℃);

3、3000g离心30 min(4℃),保留上清液;

4、上清液再加SAS到0.5:1(v/v),再次离心得到沉淀。将沉淀溶于PBS,透析除去硫酸氨;

5、杂蛋白与欲纯化蛋白在硫酸氨溶液中溶解度差别很大时,用预沉淀除杂蛋白非常有效。

(二)为避免体积过大,可用固体硫酸氨进行盐析;硫酸氨沉淀法与层析技术结合使用,可得到更进一步纯化的抗体。使用固体硫酸铵和硫酸铵饱和溶液,各有各的优缺点,比较如下:

1、造成蛋白质变质的程度:固体的硫酸铵>硫酸铵饱和溶液

利用硫酸铵饱和溶液,滴入的速度可以很快而不造成变质。不像固体硫酸铵只能磨碎慢慢加入,速度一快蛋白质变质(溶液有致密的白色气泡产生)。

2、操作的容易度:硫酸铵饱和溶液>>固体硫酸铵

固体硫酸铵最大的缺点就是不易操作,要一直敲敲敲又不能太快,所以当要溶解的蛋白质很多时,这是很累的步骤。然而硫酸铵饱和溶液比较麻烦只有在配制部分,要先加热让它饱合后,回到操作温度让它过饱和,最后用滤纸把硫酸铵结晶去掉。

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