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广州健仑生物科技有限公司
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2、结果判定
(1)牛型结核分枝杆菌感染
鸡用禽型结核分枝杆菌PPD检测阴性,无任何病变,细菌培养和涂片镜检都未见到结核分枝杆菌。同时从豚鼠和兔检测到结核分枝杆菌。或豚鼠和兔的牛型结核分枝杆菌PPD皮内*反应试验阳性并观察到典型病理变化。
(2)禽型结核分枝杆菌感染
豚鼠用牛型结核分枝杆菌PPD检测阴性,无任何病变,细菌培养和涂片镜检都未见到结核分枝杆菌。同时,从兔和鸡检测到结核分枝杆菌或兔或鸡的禽型结核分枝杆菌PPD皮内*反应试验阳性并观察到典型病理变化。
(3)人型结核分枝杆菌感染
仅从豚鼠检测到结核分枝杆菌。或仅豚鼠的牛结核分枝杆菌PPD皮内*反应试验阳性并观察到典型病理变化。
D1.1 烟酸试验
D1.1.1 试验方法
以热蒸馏水浸泡固体培养基上的培养物15min-30min,洗下。每个培养物分装入2支试管中,每管0.4mL,再加入3%联苯胺乙醇溶液0.2mL。然后向其中一管加入10%溴化氰溶液(此液剧毒,应在通风橱内操作)0.2mL。
D1.1.2 结果判定
凡含10%溴化氰溶液的试管出现桃红色沉淀,另一管只产生无色沉淀者判为阳性;两支试管都为产生无色沉淀者判为阴性。
D1.2 吐温-80(Tween-80)水解试验
D1.2.1 试验方法
向100ml磷酸缓冲液(1/15 mol/L,pH 7.0)中加入0.5ml Tween-80、2mL 0.2%中性红溶液。经112 kPa灭菌20min,分装于试管中,每管2mL。在4°C-10°C可保存2周。
取上述试管,加入10mg/mL的菌液0.5mL,37°C培养,3d-5d观察结果。
D1.2.2 结果判定
试管内由原来的琥珀色变为桃红色或红色者判为阳性。无颜色变化为阴性。
D1.3 耐热接触酶试验
D1.3.1 试验方法
用生理盐水配制出5-10mg/mL的菌液,分装试管,每管0.5 mL,以68°C水浴20 min,冷却后加入0.5mL过氧化氢(H2O2)和Tween-80混合液(10%Tween-80加等量 30% H2O2)。观察结果。