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刚果出血热病毒ELISA检测试剂盒

刚果出血热病毒ELISA检测试剂盒

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克里米亚-刚果出血热是欧、亚、非三大洲都有分布的蜱媒自然疫源性病毒疾病。人群普遍易感,感染发病以青壮年为多,但也有2.5~3岁婴幼儿被感染。临床表现与其他型出血热相似,惟肾脏的损伤较为轻微。患者入院时多呈重症,病死率高达50%。本病因在克里米亚和刚果相继发现而得名。在国内首先发现于新疆巴楚,故我国又称新疆出血热。刚果出血热病毒ELISA检测试剂盒

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刚果出血热病毒ELISA检测试剂盒

广州健仑生物科技有限公司

克里米亚-刚果出血热病毒属于布尼亚(布尼奥罗)病毒科的内罗病毒属。病毒颗粒呈圆形和椭圆形,直径约85~120纳米,外被包膜。光学镜下在鼠脑的感染组织中可见到吉姆萨染色呈嗜碱性的有如红细胞大小的胞质包涵体,而在电镜下的超薄切片中可辨认包涵体所集聚的核糖体样致密颗粒,这些可能是抗原或病毒亚单位结构。该病毒通过蜱虫叮咬或在屠宰动物过程中和屠宰后与病毒感染的组织接触而进行传播。

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基于此原理,Hugh和Leifson提出一种含有低有机氮的培养基,用以鉴定细菌从糖类产酸是属氧化型产酸或发酵型产酸。这一试验广泛用于细菌鉴定。一般用葡萄糖作为糖类代表。也可利用这一基础培养基来测定细菌从其他糖类或醇类产酸的能力。

一、Hugh-Leifson培养基组分

蛋白胨                   2g

氯钠                   5g

磷酸氢二钾               0.3g

琼脂                     4g

葡萄糖                   10g

0.2%溴麝香草酚蓝溶液     12mL

蒸馏水                   1000mL

二、配制制法

1、将蛋白胨、氯化钠和磷酸氢二钾加水溶解,调节pH至7.2。

2、加入葡萄糖、琼脂煮沸,溶化琼脂。

3、加入指示剂0.2%溴麝香草酚蓝溶液。

4、混匀后,分装试管,121℃高压灭菌15min,直立凝固备用。

三、试验方法

1、细菌接种 :以18-24h的幼龄菌种,穿刺接种在上述制备的Hugh-Leifson培养基中,每株菌接4管,其中2管用油封盖(凡士林和液体石蜡按1:1比例混合后灭菌),也可于接种后滴加溶化的1%琼脂液于表面进行封盖,约加0.5-1厘米厚,以隔绝空气为闭管。另2管不封油为开管,同时还要有不接种的闭管作对照。适温培养1、2、4、7天观察结果。

2、结果观察:

(1)氧化型产酸:仅开管产酸,氧化作用弱的菌株往往先在上部产碱(1-2天),后来才稍变酸。

(2)发酵型产酸:开管及闭管均产酸,如产气,则在琼脂柱内产生气泡。

PCR(聚合酶链式反应)是分子生物学实验室常见技术,也是DNA测序的必须步骤。PCR技术自出现以来,就被广泛用于生物学的各个研究领域,对生物学的发展起到了极大的推动作用。然而,相比于其他分子技术,PCR技术出现以后发展缓慢,至今没有大的改进与创新,是高通量测序与规模化检测的一个限制因素。

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